ВЛИЯНИЕ МОДЕЛИРОВАННОЙ МИКРОГРАВИТАЦИИ НА РЕПРОДУКЦИЮ АДЕНОВИРУСА

Повница О.Ю., Носач Л.Н.

Институт микробиологии и  вирусологи НАН Украины, Киев Украина

e-mail: povnitsa@mail.ru

Аденовирусы человека (52 серотипа) имеют широкий спектр патогенности. Здоровая иммунная система взрослого человека обычно хорошо справляется с болезнью, однако, аденовирусные инфекции - частая причина заболеваемости и смертности в случае ослабления иммунитета. Более 80% населения в детстве было инфицировано аденовирусами относящимися к группе С (серотипы 1, 2, 5 и 6), а, следовательно, вирус может сохраняться в организме в латентном состоянии. Физические и психологические стрессы, снижение иммунитета и выработки интерферона, которые наблюдаются в космическом полете, могут реактивировать латентные вирусы. Показано, что у астронавтов во время полетов реактивировались вирус Эпштейна-Барр, цитомегаловирус и вирус опоясывающего лишая. Влияние космического полета на аденовирус не исследовалось. Риск инфекционных заболеваний ассоциированных с космическим полетом увеличивается при продолжительных полетах на Луну и Марс. Аденовирусы могут находиться в окружающей среде орбитальных модулей, поскольку они достаточно устойчивы и способны длительное время выживать вне клетки (до 49 дней на пластмассе и металле).

В данном исследовании мы изучали влияние моделированной микрогравитации на репродукцию аденовирусов в различных линиях лимфобластоидных клеток, которые, в отличие от монослойных клеток, более устойчивы к влиянию условий гравитации. В исследованиях были использованы аденовирус 5 серотипа, эпителиальные (Hela) и лимфобластоидные (MT-4, Jurkat и Raji) линии клеток. Клетки выращивали и инфицировали в стационарных условиях, затем культивировали в условиях моделированной микрогравитации (используя горизонтальное клиностатирование при 4 об/мин). Инкубировали клетки от 1 до 13 дней и определяли титр синтезированного de novo вируса. Для этого, гомогенатами лимфобластоидных клеток заражали монослойные клетки Hela, через 48 час их фиксировали, окрашивали 0.01% акридином оранжевым и в люминесцентном микроскопе определяли количество инфицированных клеток, содержащих вирусспецифические внутриядерные включения.

Ранее мы показали, что условия моделированной микрогравитации не оказывают существенного влияния на морфологию и жизнеспособность лимфобластоидных клеток на протяжении 96 час культивирования. Не влияют на внеклеточный аденовирус и на функциональную активность аденовирусного генома в клетках Hela при одном цикле репликации (48 час), что выражалось в образовании в инфицированных клетках внутриядерных вирусспецифических ДНК-содержащих телец-включений и синтезе инфекционного вируса. Показали, что линии клеток Raji, MT-4 и Jurkat способны поддерживать репродукцию аденовируса в стационарных условиях, которую тестировали по экспрессии позднего антигена аденовируса – гексона и синтезе инфекционного вируса. Исследовали уровни экспрессии аденовируса в лимфобластоидных клетках в условиях клиностатирования. Количество вируса, синтезированного за один вирусный цикл репликации, было сопоставимо с контролем (вирусом, синтезированным в статических условиях). После многократных циклов репликации (7-13 дней) титр вируса снижался на 46-97%.

© Copyright 2008. All rights reserved. Contact to Victor Martynyuk: ubs@science-center.net  tel.: +38 050 6535592